Resumen Antecedentes: Ehrlichia spp. y Rickettsia spp. son dos de los principales géneros rickettsiales transmitidos por garrapatas que afectan a animales silvestres, domésticos y humanos alrededor del mundo. Objetivo: Diseñar y validar una prueba PCR dúplex para Ehrlichia y Rickettsia en garrapatas. Métodos: La validación de la prueba incluyó ensayos de sensibilidad, especificidad, reproducibilidad y robustez. En la PCR se usó groEL y ARNr 23S como genes blanco para Ehrlichia y Rickettsia, respectivamente. Resultados: El límite de detección fue de 100 copias del gen por 50 μL de reacción para Ehrlichia spp y una copia del gen de Rickettsia por 50 μL de reacción. En general, los cebadores de la prueba solo amplificaron in silico los agentes bacterianos para los cuales fueron originalmente diseñados, con la excepción de los cebadores de Rickettsia que también amplificaron Methylocystis sp. La prueba fue reproducible (precisión intermedia) en un 96.7% de las veces para ambos agentes. La prueba fue suficientemente robusta como para tolerar cambios de concentración de los diferentes reactivos, con excepción de la Taq DNA polimerasa. Conclusión: Los resultados de validación indican que la PCR es útil para detectar ambos géneros bacterianos y podria usarse para validación diagnostica.

Abstract Background: Ehrlichia and Rickettsia are two major rickettsial genera transmitted by ticks that affect a number of wild and domestic animal species and human populations around the world. Objective: To design and validate a duplex PCR for Ehrlichia and Rickettsia in ticks. Methods: Assay validation included testing for sensitivity, specificity, reproducibility, and robustness of the PCR. The groEL and 23sr RNA genes were used for Ehrlichia and Rickettsia, respectively. Results: The limit of detection was one hundred gene copies per 50 μL of reaction for Ehrlichia spp, and one gene copy of Rickettsia per 50 μL of reaction. In general, the primers of the test only amplified in silico those bacterial agents for which they were originally designed, with the exception of the primers for Rickettsia that also amplified Methylocystis sp. The test was reproducible (intermediate precision) 96.7% of the times for both agents. The test was robust enough to tolerate concentration changes of all reagents with the exception of Taq DNA polymerase. Conclusions: The validation results indicated that this PCR is useful for detection in both bacterial genera and it is a good candidate for diagnostic validation.

Resumo Antecedentes: Ehrlichia e Rickettsia são dois dos principais gêneros de rickettsias transmitidos por carrapatos que infectam tanto animais selvagens quanto animais domésticos e até homens em todo o mundo. Objetivo: O objetivo principal foi elaborar e validar uma PCR duplex para Ehrlichia e Rickettsia em carrapatos. Métodos: A validação incluiu testes de sensibilidade, especificidade, reprodução e robustez. Para o PCR, utilizamos os genes groEl e 23Sr-RNA para Ehrlichia e Rickettsia, respectivamente. Resultados: O limite de detecção foi de 100 cópias de genes por 50 ml de reação para Erliquia spp e uma cópia de gene de Rickettsia por 50 ml de reação. Em geral, os iniciadores dos testes amplificaram em modelos computacionais os agentes bacterianos para os quais eles foram projetados, exceto os primers de Rickettsia que também amplificou Methylocystis sp. Os testes foram reproduzíveis (precisão intermediária) 96,7% para ambos os agentes e foram também robustos para tolerar mudanças de concentração em todos os reagentes, exceto o reagente Taq DNA polymerase. Conclusões: Os resultados da validação indicaram que o PCR é útil para detecção em ambos os gêneros bacterianos, portanto, um bom exame para validação diagnóstica.

The objective of the present study was to evaluate the bright blue cresyl (BCB) test as an indirect method to select competent oocytes for the in vitro production of embryos (IVP). The cumulus-oocyte complexes (COC) were obtained from two Creole heifers subjected to two treatments: T1 = COC recovered by OPU (ovum pick-up) previous stimulation with FSH-LH; T2 = COC recovered from non-stimulated animals (control). The two heifers were alternated in the two treatments and five repetitions were done. Recovered COCs were classified into types A, B, C and D. Then the BCB test was applied to each of the COC types to determine if they were BCB+ or BCB-. T1 allowed to recover 5.2 more COC than T2 (p<0.05). When applying the BCB test, it was determined that all type A oocytes of T1 and T2 were BCB+; that is, they finished their growth and were ready to start the process of in vitro maturation; however, about 50% of the type B, C and D COCs of T1 and T2 were BCB+. It is concluded that the selection of COC based on morphological characteristics is a reliable method only for type A and has a 50% error for COC type B, C and D and, therefore, the application of the BCB test allows to improve this selection non-invasively.

El objetivo del presente estudio fue valorar la prueba del azul brillante de cresilo (BCB) como método indirecto para seleccionar ovocitos competentes para la producción in vitro de embriones (PIV). Los complejos cúmulos-ovocitos (COC) fueron obtenidos de dos vaquillas criollas sometidas a dos tratamientos: T1 = COC recuperados por OPU (ovum pick-up) previa estimulación con FSH-LH; T2 = COC recuperados sin previa estimulación de la donante (testigo). Las dos vaquillas fueron alternadas en los dos tratamientos y se hicieron cinco repeticiones. Los COC recuperados fueron clasificados en tipos A, B, C y D. Luego se aplicó la prueba del BCB a cada uno de los tipos de COC para determinar si son BCB+ o BCB-. T1 permitió recuperar 5.2 más COC que T2 (p<0.05). Al aplicar la prueba del BCB se determinó que todos los ovocitos tipo A de T1 y T2 fueron BCB+; es decir, terminaron su crecimiento y se encontraban listos para iniciar el proceso de maduración in vitro; sin embargo, alrededor del 50% de los COC tipo B, C y D de T1 y T2 fueron BCB+. Se concluye que la selección de COC basado en las características morfológica es un método confiable únicamente para los de tipo A, y tiene un 50% de error para los COC de tipo B, C y D y, por lo tanto, la aplicación de la prueba del BCB permite mejorar esta selección de forma no invasiva.

We have developed a study in the Embera-Katío indigenous community and we found that the seropositivity for IgG antibodies to Leptospira spp. was 18.1%; to dengue was 61.1%; to arenavirus was 3.1% and to hantavirus was 1.5%. We conclude that this indigenous community live in conditions that promote the reemerging and emerging, infections.

Introducción. La región de Urabá es endémica para varias enfermedades febriles agudas de origen infeccioso. Sin embargo, solo los pacientes con malaria pueden acceder a un diagnóstico oportuno y rápido, motivo por el cual muchos síndromes febriles no palúdicos quedan sin diagnóstico etiológico claro. Objetivo. Establecer la etiología, describir las manifestaciones clínicas y explorar algunos posibles factores de riesgo relacionados con los síndromes febriles agudos no palúdicos en pacientes procedentes de los municipios de Necoclí, Turbo y Apartadó. Materiales y métodos. Se tomaron muestras de suero en fase aguda y de convalecencia de 220 pacientes febriles negativos para malaria, provenientes de zonas rurales y urbanas de Necoclí, Turbo y Apartadó en los años 2007 y 2008. Se practicaron pruebas para diagnóstico de dengue (detección de anticuerpos IgM por ELISA), leptospirosis (detección de anticuerpos IgM e IgG por IFI), rickettsiosis (detección de anticuerpos IgG por IFI), hantavirus y arenavirus (detección de anticuerpos IgG por ELISA). Resultados. Se encontraron frecuencias de dengue, leptospirosis, rickettsiosis y arenavirus de 37,3 %, 14,1 %, 2,7 % y 0,5 %, respectivamente. Se presentaron 12 casos de coinfección de leptospirosis-dengue y uno de leptospirosis-rickettsiosis-dengue. El sexo masculino y la humedad relativa media, fueron factores de riesgo para dengue. El inicio de signos clínicos en febrero de 2008, se asoció tanto con la infección por dengue como por leptospirosis. Conclusión. Se reafirma la importancia del virus del dengue, Rickettsia spp. y Leptospira spp., como agentes causantes del síndrome febril en la región del Urabá.

Introduction: Urabá, a region on the northern coast of Colombia, is endemic to several acute febrile illnesses of infectious origin; however, only patients with malaria may have access to quick and effective diagnosis. For this reason, many non-malarial febrile patients go without a clear etiologic diagnosis. Aim: To establish the etiology and clinical signs of acute febrile non-malaria syndromes and explore some of the likely risk factors in patients originating in the municipalities of Necocli, Turbo and Apartado who exhibit these symptoms. Materials and methods: We obtained acute and convalescent sera from 220 non-malarial febrile patients from the rural and urban zones of Necocli, Turbo and Apartado during 2007 and 2008. Serologic tests for dengue (IgM by ELISA), leptospirosis (IgM and IgG by IFA), rickettsiosis (IgG by IFI), hanta and arenavirus (IgG by ELISA) were performed. Results: We found that the frequency of infection for dengue, leptospirosis, rickettsiosis and arenavirus, was 37.3%; 14.1%; 2.7% and 0.5%, respectively. There were 12 co-infection cases of leptospirosis-dengue and one of leptospirosis-rickettsiosis-dengue. Male gender and relative humidity were considered risk factors for dengue, and the beginning of clinical signs in February of 2008 was associated with the infection of dengue and leptospirosis. Conclusion: This study confirms previous records that underline the importance of Rickettsia spp, dengue virus and Leptospira spp as causal agents of febrile syndrome in this region of Colombia.

Introducción. Rattus norvegicus cumple un papel epidemiológico en el mantenimiento y dispersión de agentes zoonóticos bacterianos, virales y parasitarios de interés en salud pública. La presencia de infección por helmintos en especies Rattus cercanas a poblaciones expuestas en condiciones ambientales propicias, puede convertirse en un factor de riesgo de transmisión. Objetivo. Reportar la frecuencia de infección con Capillaria hepatica y formas larvarias de Taenia taeniaeformis en ratas silvestres (R. norvegicus) capturadas en una zona urbana de Medellín. Materiales y métodos. Se capturaron 254 ejemplares de R. norvegicus. Los hígados de 54 ejemplares que presentaron lesión hepática macroscópica durante la necropsia, fueron examinados por histopatología convencional. Resultados. La frecuencia de infección por C. hepatica fue de 20,1 % (51/254). Seis hígados fueron también positivos para larvas de T. taeniaeformis con una frecuencia de 2,4 % (6/254). Los hígados infestados con C. hepatica exhibían parásitos en el estadio adulto o juvenil y huevos ovalados con opérculos bipolares, asociados con hepatitis granulomatosa leve a moderada multifocal y acompañada por infiltrado leucocitario. Se observaron lesiones granulomatosas en resolución y fibrosis residual o calcificada que contenía huevos. Donde se encontraron cisticercos de T. taeniaeformis, el hallazgo más frecuente fueron quistes hepáticos que contenían larvas, y lesiones inflamatorias y fibróticas. Conclusión. Estos resultados indican que helmintos de potencial zoonótico circulan en R. norvegicus de ambientes urbanos. Debe investigarse la verdadera distribución de estos parásitos, para determinar el riesgo potencial que corren las poblaciones animales y humanas expuestas a adquirir este tipo de infecciones.

Introduction. Rattus norvegicus, the Norway rat, plays a pivotal role in the maintenance and spread of several zoonotic bacterial, viral and parasitic pathogens of public health interest. The presence of helminthic infections near susceptible human populations can, under appropriate environmental conditions, become a risk factor for their transmission. Objective. Frequencies of infection were reported for Capillaria hepatica and larval forms of Taenia taeniaeformis in wild rats (R. norvegicus) captured in an urban area. Materials and methods. Two hundred and fifty-four adult specimens of R. norvegicus were collected in an urban zone of Medellín, Colombia. The livers of 54 specimens that showed macroscopic hepatic lesions during necropsy were examined by conventional histopathology. Results. The frequency of infestation with C. hepatica was 20.1% (51/254). Six livers (2.4%) were also positive for larvae of T. taeniaeformis. Livers infested with C. hepatica exhibited adult or juvenile parasites and oval eggs with bipolar opercula, and were associated with mild to moderate multifocal granulomatous hepatitis with leucocyte infiltrate. Granulomatous lesions and calcified residual fibroses were found with eggs but without adult parasites. Those animals with cysticerci of T. taeniaeformis showed a high frequency of hepatic cysts containing larvae as well as inflammed and fibrotic lesions. Conclusion. Zoonotic helminths circulate at high frequency in R. norvegicus that occur in urban environments. Further research about the distribution of these parasites will determine the level of health threat they present for susceptible human and domestic animal populations.

Los virus de influenza tipo A pertenecen a la familia Orthomyxoviridae, son envueltos, pleomórficos, y contienen 8 segmentos de ARN de cadena negativa. Dichos agentes poseen tres proteínas estructurales claves: Hemaglutinina (HA), Neuraminidasa (NA) y proteína de Matriz 2 (M2). La HA y la NA son glicoproteínas de superficie, que debido a su gran diversidad fueron usadas para crear la clasificación y nomenclatura de subtipos de virus de influenza, basada en la reactividad serológica contra ellas. De acuerdo con lo anterior, hasta la fecha se han identificado 16 subtipos de HA (H1-H16) y 9 subtipos de NA (N1-N9). De los virus tipo A, los denominados H5N1 y H1N1 han demostrado ser los más patógenos. El contagio directo de los virus de influenza A de las aves a los humanos se consideraba un evento raro y su dispersión se creía que era aún más limitada, percepción que ha cambiado desde 1997 y particularmente con los últimos brotes zoonóticos de influenza en Asia y Europa. Adicionalmente, si se considera que el porcino es una especie susceptible a virus de influenza provenientes de humanos y aves, y que estos agentes infecciosos tienen la capacidad de realizar un cambio antigénico al reasociarse generando así nuevos subtipos, la potencialidad de nuevas amenazas a la población humana es cada vez más tangible. Ejemplo de lo anterior es la reciente pandemia de influenza A H1N1 en el año 2009, que atravesó fronteras sin discriminación geográfica o de especie, afectando entre el 20 y el 40% de las personas en algunas partes del mundo. Vacunas y medidas de control se desarrollan en la actualidad para afrontar esta amenaza que cada año cobra vidas humanas y animales, y nos hace temer por una nueva y más mortífera epidemia en el futuro.

Influenza A viruses which belong to the Orthomyxoviridae family, are enveloped, pleomorphic, and contain genomes of 8 single-stranded negative-sense segments of RNA. Influenza viruses have three key structural proteins: hemagglutinin (HA), neuraminidase (NA) and Matrix 2 (M2). Both HA and NA are surface glycoproteins diverse enough that their serological recognition gives rise to the traditional classification into different subtypes. At present, 16 subtypes of HA (H1-H16) and 9 subtypes of NA (N1-N9) have been identified. Among all the influenza A viruses with zoonotic capacity that have been described, subtypes H5N1 and H1N1, have shown to be the most pathogenic for humans. Direct transmission of influenza A viruses from birds to humans used to be considered a very unlikely event but its possibility to spread from human to human was considered even more exceptional. However, this paradigm changed in 1997 after the outbreaks of zoonotic influenza affecting people from Asia and Europe with strains previously seen only in birds. Considering the susceptibility of pigs to human and avian influenza viruses, and the virus ability to evolve and generate new subtypes, that could more easily spread from pigs to humans, the possibility of human epidemics is a constant menace. A recent example was the outbreak of H1N1 influenza in 2009 that crossed species and geographical borders affecting up to 20 to 40% of the people in some parts of the world. Vaccines and control measures are continuously being developed to address a threat that every year claims human and animal lives, and makes us fear for a new and more lethal strain of the virus.

Os vírus da influenza A pertencem à família Orthomyxoviridae, são envolvidos, pleomórficas, e contem oito segmentos de RNA de cadeia negativa. Os vírus da influenza têm três principais proteínas estruturais: HA (hemaglutinina), NA (neuraminidase) e proteína de matriz 2M. A hemaglutinina e a neuraminidase são glicoproteínas de superfície, que dão nome a os tipos e subtipos dos vírus da Influenza até agora têm sido identificados 16 subtipos da HA (H1-H16) e nove subtipos da NA (N1-N9). Dos vírus tipo A, chamado H5N1 e H1N1 tem demostrado que são os mais patogênicos. A transmissão direta do vírus da influenza A das aves para os humanos foi considerado um evento raro e sua propagação parecia ser mais limitada, esta percepção mudou com os recentes surtos zoonóticos da influenza. Além disso, considerando que o suíno é uma espécie suscetível ao vírus da influenza de humanos e aves, e que esses agentes infecciosos são capazes de fazer uma alteração no antígeno ao associar novamente, gerando assim novos subtipos, o potencial para novas ameaças na população humana, esta tem-se tornando mais palpável. Um exemplo disso é a recente pandemia da influenza H1N1 no 2009, que atravessou as fronteiras sem discriminação geográfica ou de espécie afectando entre o 20 o 40% das pessoas em algumas partes do mundo. Vacinas e medidas de controle são atualmente desenvolvidas para tratar a pandemia que ainda hoje continua a afetando vidas humanas e animais, e o medo latente de uma nova e mais mortal ainda não chega.

Los albores del siglo XX estuvieron marcados por el surgimiento de agentes infecciosos y el resurgimiento de otros considerados controlados, eventos ambos posiblemente conectados con alteraciones ecológicas que condujeron al reconocimiento de un notorio cambio climático, del cual apenas comenzamos a ver los efectos. Entre todas las variedades de agentes infecciosos considerados nuevos, los virus sobresalen en número no sólo por su capacidad de proliferación, sino también por su versatilidad genética, lo que los hace más diestros para evolucionar y adaptarse a nuevas circunstancias. Uno de los agentes virales más ubicuos y populares de las Américas en los últimos tiempos, son los transmitidos por roedores silvestres y urbanos, y entre estos, están los hantavirus causantes de un conocido síndrome pulmonar humano. Este género viral, del cual se han descubierto cerca de 18 agentes sólo en Suramérica en las últimas dos décadas, pertenece a la familia Bunyaviridae; aunque muchos de sus representantes sólo causan infecciones persistentes en roedores silvestres (miembros de la subfamilia Sigmodontinae) y subclínicas en el hombre, otros pueden causar una letalidad humana del 60 %. El objetivo de este documento fue revisar el estado actual del conocimiento de algunos aspectos generales de los hantavirus y las enfermedades que producen en el mundo, mencionando de paso los hallazgos más recientes en nuestro país. Al final se discuten algunas de las muchas dudas aún presentes respecto a la importancia clínica y los impactos que estos agentes puedan ocasionar sobre la salud pública humana en Colombia.

The dawning of the 20th century was marked by the emergence of new infectious disease agents and the appearance of others previously thought controlled. Both phenomena were possibly connected with ecological disturbances that led to the recognition of a dramatic climate change, of which the effects are only now becoming noticeable. Among the variety of agents to be considered, the many new viruses stand out, not only for their numerical proliferation, but also for their genetic versatility. It is this quality that provides them dexterity for evolving new strategies and adaptations to changing environmental conditions. Recently, some of the most ubiquitous and well-publicized viral agents in the American continents have been the rodent-borne viruses, and among these are the hantaviruses, etiological agents of pulmonary syndromes. Approximately 18 hantaviruses (belonging to the family Bunyaviridae), have been discovered in South America during the last 20 years, and although most of them cause persistent infections and subclinical infections in wild rodents (particularly members of the subfamily Sigmodontinae) and humans respectively; some others might also be highly lethal for humans. The goal herein is to review the state of the art regarding general aspects of hantaviruses and the diseases they cause around the world, highlighting the most recent findings in Colombia. Finally, the many unanswered questions will be recognized and highlighted concerning clinical importance and socio-economic impact of these agents on quality of public health in Colombia.

Objective Assessing the frequency of antibodies directed against pathogenic Leptospira species found in natural reservoirs for establishing evidence of their potential role in the environmental dispersion of Leptospira and consequent dissemination of the infection to humans as well as to other susceptible species. Material and methods A survey was carried out in the Plaza Minorista from August 2006 to April 2007 in which 254 rats (Rattusnorvegicus) were captured. Blood was obtained from these rodents by cardiac puncture and the resulting serum was used for microagglutination tests. Results Serological analysis for verifying Leptospira spp circulating serovars resulted in 64 rodents (25.2 %;19.5-30.1 95 %CI) having positive antibody titres for at least 11 of the serovars tested. Conclusions Frequency data regarding the antibodies so detected showed that the Icterohaemorrhagiae serovar was not the only one possibly associated with this reservoir species, but also with others such as the Grippothyphosa and Canícolaserovars. The study determined the frequency of antibodies against pathogenic Leptospira species for reservoirs from an urban area in Colombia. This data is relevant for public health authorities and might constitute the basis for implementing appropriate control campaigns for this area of the country and, likewise, this work could serve as a model for similar studies in other Colombian cities.

Objetivo Determinar la frecuencia de anticuerpos dirigidos contra especies de Leptospira patógenas en reservorios naturales, con el propósito de establecer evidencia de su papel potencial en la dispersión ambiental de Leptospira y por consiguiente su actuación como agente diseminador de la infección tanto al humano como a otras especies susceptibles. Materiales y métodos El muestreo se llevó a cabo en la Plaza Minorista durante el periodo comprendido entre agosto de 2006 y abril de 2007, en el cual se capturaron 254 roedores Rattus norvegicus. Se obtuvo sangre de estos por punción cardiaca y el suero resultante se procesó con la prueba de Microaglutinación. Resultados El análisis serológico para verificar las serovariedades circulantes de Leptospira spp, dio como resultado que 64 roedores (25,2 %, 95 % CI=19,5-30,1) tuvieron títulos positivos para al menos una de las 11 serovariedades probadas. Conclusiones Los datos muestran que no solo la serovariedad Icterohaemorrhagiae está asociada con esta especie reservoria; también lo están otras serovariedades como Grippothyphosa y Canícola. El estudio permitió determinar la frecuencia de anticuerpos contra especies patógenas de Leptospira para reservorios procedentes de una zona urbana colombiana. Estos datos son relevantes para las entidades de salud pública por constituir la base para la implementación de campañas de control adecuadas para esta zona del país y como modelo de otros estudios similares en otras ciudades colombianas.

Objetivo Determinar la frecuencia de anticuerpos dirigidos contra especies de Leptospira patógenas en reservorios naturales, con el propósito de establecer evidencia de su papel potencial en la dispersión ambiental de Leptospira y por consiguiente su actuación como agente diseminador de la infección tanto al humano como a otras especies susceptibles. Materiales y métodos El muestreo se llevó a cabo en la Plaza Minorista durante el periodo comprendido entre agosto de 2006 y abril de 2007, en el cual se capturaron 254 roedores Rattus norvegicus. Se obtuvo sangre de estos por punción cardiaca y el suero resultante se procesó con la prueba de Microaglutinación. Resultados El análisis serológico para verificar las serovariedades circulantes de Leptospira spp, dio como resultado que 64 roedores (25,2 %, 95 % CI=19,5-30,1) tuvieron títulos positivos para al menos una de las 11 serovariedades probadas. Conclusiones Los datos muestran que no solo la serovariedad Icterohaemorrhagiae está asociada con esta especie reservoria; también lo están otras serovariedades como Grippothyphosa y Canícola. El estudio permitió determinar la frecuencia de anticuerpos contra especies patógenas de Leptospira para reservorios procedentes de una zona urbana colombiana. Estos datos son relevantes para las entidades de salud pública por constituir la base para la implementación de campañas de control adecuadas para esta zona del país y como modelo de otros estudios similares en otras ciudades colombianas.

Objective Assessing the frequency of antibodies directed against pathogenic Leptospira species found in natural reservoirs for establishing evidence of their potential role in the environmental dispersion of Leptospira and consequent dissemination of the infection to humans as well as to other susceptible species. Material and methods A survey was carried out in the Plaza Minorista from August 2006 to April 2007 in which 254 rats (Rattusnorvegicus) were captured. Blood was obtained from these rodents by cardiac puncture and the resulting serum was used for microagglutination tests. Results Serological analysis for verifying Leptospira spp circulating serovars resulted in 64 rodents (25.2 %;19.5-30.1 95 %CI) having positive antibody titres for at least 11 of the serovars tested. Conclusions Frequency data regarding the antibodies so detected showed that the Icterohaemorrhagiae serovar was not the only one possibly associated with this reservoir species, but also with others such as the Grippothyphosa and Canícolaserovars. The study determined the frequency of antibodies against pathogenic Leptospira species for reservoirs from an urban area in Colombia. This data is relevant for public health authorities and might constitute the basis for implementing appropriate control campaigns for this area of the country and, likewise, this work could serve as a model for similar studies in other Colombian cities.

El virus del Oeste del Nilo (WNV) es un agente del género Flavivirus transmitido por artrópodos. La infección con WNV ha sido demostrada en muchas especies de aves, mamíferos y reptiles. El WNV puede afectar el sistema nervioso de humanos, caballos y aves causando enfermedad de leve a severa, ocasionando la muerte en algunos casos. En 1999, el virus fue introducido en Norteamérica causando un brote en la ciudad de New York. En los siguientes años, el virus se extendió por Norteamérica, y posteriormente fue encontrado en el Caribe, Centro y Suramérica. El primer reporte de anticuerpos para WNV en Colombia se hizo en 2005, en equinos de la costa Atlántica. En el presente estudio se extendió la búsqueda de anticuerpos a otros dos Departamentos de Colombia: Antioquia y El Meta. Primero se determinó la presencia de anticuerpos IgM e IgG, y los sueros reactivos fueron procesados para anticuerpos neutralizantes por la técnica de reduccion de placas para confirmar los resultados. Cuatro equinos de Antioquia y ninguno de El Meta fueron positivos para anticuerpos anti-WNV. Los resultados sugieren que el WNV está ampliamente distribuido en la costa Atlántica de Colombia y ha iniciado su dispersión por la zona andina.

West Nile Virus (WNV) is an arthropod-borne agent classified in the Flavivirus genus. Infection has been demonstrated in many vertebrate species including birds, mammals and reptiles. WNV can affect the nervous system of humans, horses and birds causing mild to severe illness and sometimes death. In 1999 WNV was introduced into the Americas causing a small outbreak in New York City. In the following years, the virus spread across North America and later into Central America, the Caribbean and parts of South America. Serological evidence of WNV in Colombia was first documented in 2005 in equines from the Atlantic coast; however clinical cases in humans or animals have not been reported. We extended these studies searching for WNV antibodies in sera of equines of two other provinces in Colombia: Antioquia and El Meta. IgG and IgM antibodies were first determined and reactive sera were processed by plaque reduction neutralization test (PRNT) to confirm the specificity of results. Four horses from Antioquia but none from El Meta tested positive for WNV antibodies. These results suggest that WNV has spread across the Atlantic coast and is now invading the Andean region in Colombia.

O vírus do Nilo Ocidental é um agente transmitido por artrópodes e pertence ao género Flavivirus. A infecção tem sido demonstrada em várias espécies de vertebrados incluindo pássaros, mamíferos e répteis. O vírus do Nilo Ocidental pode afectar o sistema nervoso de humanos, eqüinos e pássaros, causando doença de severidade média à grave a qual pode causar a morte em alguns casos. Em 1999, o vírus do Nilo Ocidental foi introduzido no continente americano, causando um surto na cidade de Nova York. Posteriormente, o vírus se disseminou pela América do Norte e mais tarde pela América Central, Caribe e parte da América do Sul. Os primeiros relatos do vírus do Nilo Ocidental na Colômbia surgiram em 2005 afectando eqüinos na costa atlântica. O objectivo desse trabalho foi buscar anticorpos contra o vírus do Nilo Ocidental no soro de equinos de dois estados da Colômbia: Antioquia e Meta. Anticorpos da classe IgG e IgM foram primeiramente determinados e soros reactivos foram analisados pela técnica de neutralização por redução em placa (PRNT) para confirmar a especificidade dos resultados. Quatro equinos provindos da Antioquia apresentaram resultados positivos para anticorpos contra o vírus do Nilo Ocidental; entretanto não foram detectados anticorpos nos animas provindos do Meta. Estes resultados sugerem que o vírus do Nilo Ocidental tem se disseminado através da costa atlântica e está agora invadindo a região andina na Colômbia.

Las Encefalopatías Espongiformes Transmisibles, también llamadas enfermedades priónicas, son un grupo de enfermedades neurodegenerativas, que afectan una gran variedad de mamíferos. El agente responsable de estas patologías se ha identificado como una isoforma anormal de una proteína celular, la cual luego de sufrir un cambio conformacional (prion), adquiere la capacidad de comportarse como un agente infeccioso. Se ha demostrado la capacidad de los priones para cruzar la barrera de especies entre el ganado y los seres humanos; lo cual se ha reflejado en un problema de salud pública que ha afectado gravemente a los países donde se han presentado brotes de estas enfermedades. Las Encefalopatías Espongiformes Transmisibles se han reportado en una gran cantidad de países y Colombia no ha sido ajena a la presencia de casos esporádicos humanos, no relacionados con el consumo de material contaminado procedente de animales enfermos. Con el presente artículo se pretende dar una visión de la historia y el estado actual de Colombia frente a estas enfermedades, las cuales representan una grave amenaza para la salud pública y la agrocadena ganadera del país.

Transmissible Spongiform Encephalopaties, also called prion diseases, are a group of neurodegenerative diseases affecting a variety of mammals. The responsible agent consists of an abnormal isoform of a cellular protein that suffers a conformational change (prion), acquiring the ability of being transmissible. It has been demonstrated prions capacity to cross the species barrier between the cattle and humans; affecting public health in countries with reported cases of bovine spongiform encephalopathy. The transmissible spongiform encephalitis have been reported in a number of countries and Colombia is not the exception with some human sporadic cases, not related with the intake of contaminated material from sick animals. With this manuscript we pretend to give a view of the history and the current state of prion diseases in Colombia, which represent a serious threat for the public health and the cattle industry of the country.

As doenças encefalopatias espongiformes transmissíveis, são do grupo de doenças neurodegenerativas, que afetam uma grande variedade de mamíferos. O agente responsável de estas patologias está identificado como uma isoforma anormal de uma proteína celular, a qual logo de apresentar uma mudança de conformação (prião), adquire a capacidade de comportar-se como um agente infeccioso. Tem-se demonstrado a capacidade que tem o prião para ultrapassar a barreira de espécies entre o gado e o ser humano; o qual está refletido gravemente aos países onde tem-se apresentado estas doenças. As encefalopatias espongiformes transmissíveis estão reportadas em uma grande quantidade de países. Na Colômbia tem-se apresentado casos esporádicos em humanos, não relacionados com o consumo de material contaminado procedente de animais doentes. O presente artigo, busca dar uma visão da historia e o estado atual da Colômbia frente as doenças, as quais representam uma grave ameaça para a saúde pública e da pecuária do pais.

El objetivo de este trabajo fue establecer un sistema de detección y amplificación del Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) a partir de muestras de materia fecal bovina, mediante el uso de la técnica de PCR en tiempo real, como estrategia de apoyo para el establecimiento de un programa de prevención detección y control de la paratuberculosis bovina en el hato lechero de la Universidad de Antioquia. Muestras de materia fecal fueron tomadas de bovinos provenientes de un hato enzoótico para la enfermedad de Johne, fueron cultivadas en medio de cultivo líquido Middlebrook 7H9 suplementado con micobactina, bajo dos protocolos de aislamiento: con o sin inhibidores. Como control negativo fue utilizada muestras de materia fecal de bovinos clínicamente sanos. Adicionalmente, con el DNA de las muestras aisladas en cultivo y de las muestras de materia fecal, fueron hechas pruebas de PCR convencional y en tiempo real, para la amplificación del elemento de inserción IS900 del MAP, mediante el uso de cebadores específicos para este elemento. Como control positivo se utilizó DNA de MAP de una cepa de referencia. Los resultados fueron evaluados mediante estadística descriptiva y la comparación entre el resultado del cultivo y de la prueba de PCR fue evaluado mediante regresión simple. Los resultados del cultivo bacteriológico, mostraron un total de 15 muestras con crecimiento compatible con MAP, el cual fue verificado por prueba de PCR en el 13.3% de los casos. No hubo correlación entre el resultado de cultivo y la prueba de PCR ni entre el estado clínico y la positividad al MAP. Los resultados confirman la necesidad de combinar el diagnóstico molecular con el cultivo bacteriológico para identificar las vacas positivas en un hato. Finalmente, una estrategia de prevención y control de la enfermedad aplicable a este hato enzoótico y a los hatos lecheros en Colombia es discutida.

The aim of this study was to establish the protocol of conventional and real time PCR for amplification of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) genome from bovine fecal samples, as a way to define strategies for establishing a prevention and control program in a dairy herd at the Universidad de Antioquia (Medellín, Colombia). Fecal samples were individually taken of clinical healthy cows or cows with diarrhea bred in a herd enzootic for Johne's disease, were processed them for culture in liquid Middlebrook 7H9 media supplemented with mycobactin under two different protocols: with or without inhibitors. Fecal samples from clinically healthy cows were used as negative control. Conventional and real time PCR were performed with MAP DNA obtained of fecal or cultured samples. The MAP- specific IS900 segment was amplified by using the respective forward and reverse primers. DNA isolated from a reference MAP strain was used as positive control of PCR. Data were analyzed by descriptive statistics and simple regression analysis between PCR and culture results were performed. All samples cultured in media with or without mycobactin gave a positive result compatible with MAP growth. However, only 13,3% of samples were positive by real time PCR. There was no relationship neither between PCR and culture results, nor between clinical condition of the cow and MAP positivity. These results support the need combine culture of feces with PCR diagnosis for identification of MAP-excreting cows in a dairy herd. Finally, a strategy of prevention and control of bovine paratuberculosis is proposed for this enzootic herd and for dairy herds in Colombia.

O objetivo deste estudo foi estabelecer um sistema de detecção e amplificação do Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) a partir de amostras fecais bovinas, utilizando a técnica de PCR em tempo real, como uma estratégia para apoiar o estabelecimento de um programa rastreio para a prevenção e controle de la paratuberculosis bovina no rebanho leiteiro da Universidade de Antioquia. Foram colhidas amostras de fezes de gado bovino a partir de uma fazenda enzoótica para a doença de Johne, e foram cultivadas em meio de cultura líquida Middlebrook 7H9 suplementado com micobactina, sob dois protocolos de isolamento: com ou sem inibidores. Foram utilizadas como controle negativo amostras fecais de bovinos saudáveis. Além disso, as amostras de DNA isoladas e cultivadas a partir de amostras fecais foram realizadas testes de PCR convencional e em tempo real, para amplificação elemento de inserção IS900 no MAP. Foi utilizado como controle positivo do teste DNA de uma estirpe de referencia. Os resultados foram avaliados por estatística descritiva e as comparações entre os resultados de cultura e teste PCR foram avaliadas por regressão simple. Os resultados de cultura bacteriológica mostraram 100% de crescimento em amostras com MAP, que foi verificada por PCR em 13,3% dos casos. Não houve correlação entre o resultado do cultivo e teste PCR ou entre a clínica e a positividade para MAP. Os resultados confirmam a necessidade de combinar o diagnóstico molecular com cultura bacteriológica para identificação positiva de vacas em um rebanho. Finalmente, uma estratégia de prevenção e controle da doença aplicável neste rebanho enzoótico e os rebanhos leiteiros e na Colômbia é discutida.